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| 先生： |
水稻種子是人類(lèi)重要的食物來(lái)源，分子病理技術(shù)服務(wù)，其發(fā)育涉及一個(gè)復(fù)雜的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，其中轉(zhuǎn)錄因子發(fā)揮了關(guān)鍵作用。MADS轉(zhuǎn)錄因子家族成員是植物花器1官發(fā)育的重要調(diào)控因子，已有的研究表明，幾乎所有的水稻MADS基因都在種子中表達(dá)，但對(duì)MADS家族成員參與水稻種子發(fā)育調(diào)控的研究結(jié)果仍比較少。
在這項(xiàng)研究中，研究組基于前期的表達(dá)譜研究基礎(chǔ)，分析得到了一個(gè)在水稻生殖發(fā)育階段優(yōu)先表達(dá)的轉(zhuǎn)錄因子MADS29。細(xì)致分析表明，MADS29在花藥、胚珠和種子中均表達(dá)，且在受精后的母體組織表達(dá)量高。MADS29的反義轉(zhuǎn)1基因植株呈現(xiàn)種子皺縮、淀粉粒形態(tài)異常、灌漿速率下降等表型。通過(guò)解剖學(xué)切片、末端轉(zhuǎn)移酶標(biāo)記實(shí)驗(yàn)和全基因組表達(dá)譜芯片分析等，研究人員證明了MADS29通過(guò)調(diào)控程序化死1亡(PCD)過(guò)程促進(jìn)珠心細(xì)胞和珠心突起處的降解。進(jìn)一步的體外凝膠阻滯實(shí)驗(yàn)顯示，MADS29能夠通過(guò)直接結(jié)合程序化死1亡相關(guān)基因的啟動(dòng)子區(qū)域而調(diào)控其表達(dá)，進(jìn)而影響胚乳發(fā)育。
1，組化
實(shí)驗(yàn)原理：組化（IHC），是應(yīng)用抗原與特異性結(jié)合的原理，通過(guò)酶標(biāo)與底物反應(yīng)顯色，從而對(duì)組織細(xì)胞內(nèi)抗原進(jìn)行定位、定性及定量的研究，稱(chēng)為組織化學(xué)技術(shù)。組化（IHC）具有特異性強(qiáng)、敏感度高、定位準(zhǔn)確的優(yōu)點(diǎn)。
1， 熒光
實(shí)驗(yàn)原理：熒光（IF），是應(yīng)用抗原與特異性結(jié)合的原理，通過(guò)熒光標(biāo)記對(duì)組織細(xì)胞內(nèi)抗原進(jìn)行定位、定性及定量的研究。目前皮諾飛生物主要可以對(duì)石蠟切片、冰凍切片、細(xì)胞爬片、組織芯片進(jìn)行熒光檢測(cè)。皮諾飛生物目前已突破傳統(tǒng)的熒光雙標(biāo)限制，開(kāi)發(fā)出多色熒光技術(shù)（多可達(dá)7色）。
原位末端凋亡檢測(cè)（Tunel）
實(shí)驗(yàn)原理： TUNEL技術(shù)可對(duì)組織或細(xì)胞中凋亡小體或單個(gè)凋亡細(xì)胞進(jìn)行染色，能準(zhǔn)確反映細(xì)胞凋亡典型的生物化學(xué)和形態(tài)特征。凋亡細(xì)胞內(nèi)內(nèi)源性核酸內(nèi)切酶被而將自身染色體DNA切斷成缺口或3-OH末端片段這一特點(diǎn)，利用脫氧核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶將標(biāo)有標(biāo)記物(如，生物素或熒光素)的脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移到3-OH末端，再用組化法或熒光檢測(cè)凋亡細(xì)胞。
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第2年
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