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熒光原位雜交(Fluorescence in situ hybridization,F(xiàn)ISH)技術(shù)是在已有的性原位雜交技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種非性DNA分子原位雜交技術(shù)。它利用熒光標記的核酸片段為探針,與染色體上或DNA顯微切片上的特異fl-N:~行雜交,通過熒光檢測系統(tǒng)(熒光顯微鏡)檢測信號DNA序列在染色體或DNA顯微切片上的目的DNA序列,進而確定其雜交位點。FISH技術(shù)檢測時間短,檢測靈敏度高,無污染,已廣泛應(yīng)用于染色體的鑒定、基因定位和異常染色體檢測等領(lǐng)域。

熒光原位雜交(fluorescence in situ hybridization,F(xiàn)ISH)是在20世紀80年代末在性原位雜交技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種非性分子細胞遺傳技術(shù),以熒光標記取代同位素標記而形成的一種新的原位雜交方法,探針首先與某種介導分子(reporter molecule)結(jié)合,雜交后再通過細胞化學過程連接上熒光染料.FISH的基本原理是將DNA(或RNA)探針用特殊的核苷酸分子標記,然后將探針直接雜交到染色體或DNA纖維切片上,再用與熒光素分子偶聯(lián)的單與探針分子特異性結(jié)合來檢測DNA序列在染色體或DNA纖維切片上的定性、定位、相對定量分析.FISH具有安全、快速、靈敏度高、探針能長期保存、能同時顯示多種顏色等優(yōu)點,不但能顯示中期分裂相,還能顯示于間期核.同時在熒光原位雜交基礎(chǔ)上又發(fā)展了多彩色熒光原位雜交技術(shù)和染色質(zhì)纖維熒光原位雜交技術(shù).

植物原位雜交的應(yīng)用包括:

研究基因表達:通過觀察熒光信號的位置和數(shù)量,可以確定目標基因在植物組織中的表達模式和位置。

染色體定位:將目標基因與染色體中的特定位置進行比較,可以確定目標基因在染色體中的位置和分布。

基因:通過原位雜交技術(shù),GISH,可以確定目標基因的序列和位置,為基因提供重要的參考信息。

檢測物種或品種特異性:通過原位雜交技術(shù)可以檢測出不同物種或品種之間基因表達的差異,從而為物種或品種特異性研究提供依據(jù)。

遺傳育種:通過原位雜交技術(shù)可以檢測出不同品種之間基因表達的差異,從而為遺傳育種提供重要的參考信息。

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